Медицинская радиология и радиационная безопасность. 2015. Том 60. № 2. С. 47-55

РАДИАЦИОННАЯ МЕДИЦИНА

Е.Э. Западинская, О.А. Тихонова, И.И. Еремин, В.Ю. Нугис, Ю.А. Жгутов, М.Г. Козлова

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ИНФОРМАТИВНОСТИ ТЕСТА BE-LPT ПО ИЗУЧЕНИЮ СТИМУЛЯЦИИ ПРОЛИФЕРАЦИИ ЛИМФОЦИТОВ У ЛИЦ, КОНТАКТИРОВАВШИХ С БЕРИЛЛИЕМ

Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И.Бурназяна ФМБА России, Москва, e-mail: Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

РЕФЕРАТ

Цель: Разработать критерии и алгоритм диагностики хронической бериллиевой болезни с помощью лабораторных методов in vitro для своевременного выявления лиц, предрасположенных к развитию данного пневмокониоза.

Материал и методы: В настоящее время тест пролиферации лимфоцитов с бериллием (BeLPT тест) является основным методом для выявления состояния гиперчувствительности к бериллию при скрининге работников бериллиевых производств. В России данная методика не получила широкого применения. В настоящем исследовании цитометрический BeLPT тест был использован для измерения пролиферации лимфоцитов в группах пациентов, подвергшихся воздействию бериллия (24 человека) и контрольных пациентов, не контактировавших с бериллием (18 человек). Параллельно было изучено влияние бериллия на пролиферацию лимфоцитов периферической крови в ФГА-стимулированных культурах методом дифференцированного окрашивания сестринских хроматид (флуоресцент + Гимза). Данный метод позволяет определять содержание метафаз первого, второго и последующих митозов в культурах и ранее не использовался для определения сенсибилизации людей к бериллию. Основным критерием отбора пациентов в основную группу наблюдения являлся документально подтвержденный факт контакта с соединениями бериллия.

Результаты: Специфическая сенсибилизация у больных основной группы с помощью теста BeLPT была выявлена только у одного человека. Следующие результаты были получены с помощью метода флуоресцент + Гимза: как в основной, так и контрольной группах наблюдалась тенденция к ускорению пролиферации лимфоцитов в культуре при добавлении BeSO₄ в конечной концентрации 1 мкМ. Однако при больших концентрациях BeSO₄ (10 и 100 мкМ) в группе больных-носителей бериллия в среднем наблюдался возврат к тому же уровню пролиферации, как и в культурах без бериллия. Напротив, в контрольной группе стимулирующий эффект сохранялся.

Выводы: 1. Пока нет возможности достоверно оценить информативность BeLPT теста, т.к. в России нет стандартного протокола данной методики и общепринятых вариантов расшифровки результатов анализа. 2. Для повышения достоверности полученных результатов и более точной интерпретации эффективности BeLPT теста необходимо увеличить число наблюдений (число лиц в когортах).

Ключевые слова: хроническая бериллиевая болезнь, пролиферация лимфоцитов, тест BeLPT, метод флуоресцент + Гимза

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Newman L.S., Mroz M.M., Balkissoon R., Maier L.A. Beryllium sensitization progresses to chronic beryllium disease: a longitudinal study of disease risk // Amer. J. Respir. Crit. Care Med. 2005. Vol. 171. No. 1. P. 54-60.
2. Newman L.S., Kreiss K., KingT.E. Jr. et al. Pathologic and immunologic alterations in early stages of beryllium disease. Re-examination of disease definition and natural history // Amer. Rev. Respir. Dis. 1989. Vol. 139. No. 6. P. 1479-1486.
3. Kreiss K., Newman L.S., Mroz M.M., Campbell P.A. Screening blood test identifies subclinical beryllium disease // J. Occup. Med. 1989. Vol. 31. No. 7. P. 603-608.
4. Schuler C.R.1, Virji M.A., Deubner D.C. et al. Sensitization and chronic beryllium disease at a primary manufacturing facility. Part 3: Exposure-response among short-term workers // Scand. J. Work Environ. Health. 2012. Vol. 38. No. 3. P. 270-281.
5. Пяткин Е.К., Нугис В.Ю. Использование методики дифференциального окрашивания сестринских хроматид для изучения пролиферативной активности лимфоцитов периферической крови человека в культуре в норме и после γ-облучения in vitro // Радиобиология. 1980. T. 20. № 6. С. 871-876.
6. Middleton D., Kowalski P. Advances in identifying beryllium sensitization and disease // Int. J. Environ. Res. Public Health. 2010. No. 7. P. 115-124.
7. Deubner D.C., Goodman M., Iannuzzi J. Variability, predictive value, and uses of the beryllium blood lymphocyte proliferation test (BLPT): Preliminary analysis of the ongoing workforce survey // Appl. Environ. Hyg. 2001. Vol. 16. No. 5. P. 521-526.
8. Middleton D.C., Lewin M.D., Kowalski P.J. et al. The BeLPT: Algorithms and interpretations // Amer. J. Ind. Med. 2006. Vol. 49. No. 1. P. 36-44.
9. Maier L.A. Beryllium health effects in the era of the beryllium lymphocyte proliferation test // Appl. Environ. Hyg. 2001. Vol. 16. No. 5. P. 514-520.
10. Kreiss K., Wasserman S., Mroz M.M., Newman L.S. Beryllium disease screening in the ceramics industry: blood lymphocyte test performance and exposure-disease relations // J. Occup. Med. 1993. Vol. 35. No. 3. P. 267-274.
11. Newman L.S., Mroz M.M., Balkissoon R., Maier L.A. Beryllium sensitization progresses to chronic beryllium disease: a longitudinal study of disease risk // Amer. J. Respir. Crit. Care Med., 2005. Vol. 171. No. 1. P. 54-60.
12. Wallace P.K., Tario J.D. Jr., Fisher J.L.. et al. Tracking antigen-driven responses by flow cytometry: monitoring proliferation by dye dilution // Cytometry, 2008. Vol. 73A. No. 11. P. 1019-1034.
13. Milovanova T.N. Comparative analysis between CFSE flow cytometric and tritiated thymidine incorporation tests for beryllium sensitivity // Cytometry, 2007. Vol. 72B. No. 4. P. 265-275.
14. Milovanova T.N., Popma S.H., Cherian S. et al. Flow cytometric test for beryllium sensitivity // Cytometry, 2004. Vol. 60B. No. 1. P. 23-30.
15. Снигирева Г.П., Богомазова А.Н., Новицкая Н.Н. и соавт. Биологическая индикация радиационного воздействия на организм человека с использованием цитогенетических методов. Медицинская технология № ФС-2007/015-У. М. 2007. 29 с.
16. Crossen P.E., Morgan W.F. Analysis of human lymphocyte cell cycle time in culture measured by sister chromatid differential staining // Exp. Cell. Res. 1977. Vol. 104. No. 2. P. 453-457.

Для цитирования: Западинская Е.Э., Тихонова О.А., Еремин И.И., Нугис В.Ю., Жгутов Ю.А., Козлова М.Г. Сравнительный анализ информативности теста Be-LPT по изучению стимуляции пролиферации лимфоцитов у лиц, контактировавших с бериллием. Медицинская радиология и радиационная безопасность. 2015. Т. 60. № 2. С. 47-55.

PDF (RUS) Полная версия статьи